高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊苷含量

甜菊糖苷是多年生菊科草本植物甜叶菊叶片中含有的一系列四环二萜类化合物，是一种低热量、高甜度的天然甜味剂，是重要的食品添加剂之一。甜菊糖苷中主要糖苷为甜菊苷和瑞鲍迪苷A，其他已知糖苷还包括瑞鲍迪苷B，瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷及甜菊双糖苷。

关于甜菊糖苷的检测，报道中多采用水提液直接进样的方法，色谱分离采用以C18为主的反相色谱或以氨基为主的亲水作用色谱，也有报道采用近红外光谱法进行检测。本文参照GB8270-2014《食品安全国家标准 食品添加剂 甜菊糖苷》标准，建立高效液相色谱法测定食品添加剂甜菊糖苷中甜菊苷含量的方法，供食品行业相关分析人员参考。

一、实验部分

仪器设备与试剂

LC-5520 液相色谱仪（紫外检测器）；

AS-405 自动进样器；DM-101 在线脱气机；乙腈：色谱纯；磷酸二氢钠；磷酸；甜菊苷标准品。

二、实验条件

色谱柱：C18，250 mm×4.6mm，5μm；

流动相：乙腈-磷酸钠缓冲溶液(pH2.6)=32＋68；

流速：1.0 mL/min；

检测波长：210 nm；

柱温：40℃；

进样量：20 μL。

样品处理：称取适量试样，精确至0.001g，至于容量瓶中，用乙腈水定容（V/V=30:70）。

三、实验结果

标准谱图

甜菊苷标样谱图

样品检测

吸取试样溶液，注入色谱仪进行分析。以色谱峰面积定量。样品谱图如下图所示。

样品谱图

四、实验总结

本文根据GB8270-2014《食品安全国家标准 食品添加剂 甜菊糖苷》标准，采用反相C18色谱柱建立高效液相色谱法测定食品添加剂甜菊糖苷中甜菊苷含量的方法。该方法样品前处理简便经济，可移植性好，可为糖苷检测及加工过程提供技术支撑。

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