TTC法检测牛奶中抗生素残留

TTC法是我国鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB4689.27—94）的检测法，属生物检测法。其测定原理基于抗生素对微生物的抑制作用。如果牛奶中含有抗生素，则加入菌种（嗜热链球菌）经培育2.5~3小时后，加入TTC指示剂(三苯基四氮唑)不发生还原反应,所以样品呈无色状态；如果牛奶中不含抗生素，则样品呈红色，这样实验后样品颜色不变的为阳性，样品染成红色的为阴性。

TTC法的具体操作步骤：

1.菌液制备：将单菌种(嗜热链球菌)以脱脂乳为培养基，在36±1℃培养箱中培养15小时后，再以脱脂乳以至于1:1稀释待用；

2.取待检样液9mL，在80℃水浴加热5分钟后冷却到37℃以下，加活菌液1mL，在36℃±1℃水浴2小时，加入4%的TTC指示剂0.3mL，36℃±1℃水浴培养30分钟；

3.若样液颜色不变为阳性，呈红色为阴性;若阳性的样液，再置于水浴中培养30分钟，不显色的为阳性,呈红色为阴性。

TTC法测定各种抗生素的灵敏度为：青霉素：4ppb，链霉素:500ppb，庆大霉素:400ppb，卡那霉素:5000ppb。它具有费用低,易开展的优点;缺点是耗时长，要求操作人员需有一定专业知识且实验过程中菌液的制备、水浴过程控制都要求严格遵守操作规程，否则易出现假阳性，以致出现检验结果的不稳定性。

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