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尼康ECLlPSE 80i荧光显徼镜操作规程

【来源/作者】北纳创联 【更新日期】2015-08-12

二、尼康ECLlPSE 80i荧光显徼镜操作规程

1.操作规程

(1)明场显微术

1)打开显微镜右后面电源装置开关(开关置于“l”位置),按下左后面C-box2蓝色按钮开关。另外,打开照相机的控制单元及电脑等外周设备。

2)按下机座前面照明开关打开明场照明,调节机座右侧光度旋钮至预设位置。

3)将机座左侧面ND8、ND32、NcB11滤光片移至光路中(NcB11是白光平衡片,ND8、ND32两个减光片分别将光强减弱为原来的l/8和1/32)。

4)推插左侧目镜筒旁的光路转换杆,使目镜筒充满光路。将光路切换到肉眼观察方式。

5)聚光旋钮提升聚光镜到最高位置。转动激发方式转换盘放在没有激发块的空位处。

6)视场调节盘和孔径光阑转杆将视场光阑和孔径光阑完全开启。

7)将10倍物镜置于光路中。

8)放置标本置载物台并固定,将待观察部分置于光路中。

9)粗微调对准标本调焦。

10)目镜调节。a.转动目镜调节环至参考位置目镜后,10×物镜移入光路,旋转聚光旋钮粗调。b.40×物镜移人光路,旋转聚光旋钮粗/微调。c.将4×或10×物镜移人光路.分别调节左右目镜的调节环来聚焦,不要动聚焦旋钮。d.重复b和c操作。e.调节左右目镜距离使重叠成单一图像。

11)调节聚光镜。a.10×物镜移人光路.调节视场调节盘至最小位置,旋转聚光调节旋钮使标本表面形成视野光阑图像。b.旋转聚光居中螺钉使视野光阑图像位于视野中央。c.40×物镜移人光路,粗微调聚焦于标本。d.旋转聚光调节旋钮使标本表面形成视野光阑图像e.旋转聚光居中螺钉使视野光阑图像位于目镜视野中央为止(宜调节视野光阑图像孔径稍小于物镜视野)。

12)转换到所需物镜,观察标本,每次转换物镜都要调节视场光阑和孔径光阑。孔径光阑一般放在物镜NA值80%的位置,如果需要比较好的对比度,可以适当关小iL径光阑。

13)关闭电源装置开关。

(2)落射荧光显微术

①关闭显微镜电源开关。

②关闭荧光光闸以阻断落射照明光。

③将要使用的激发法相应荧光块移人光路。

④完全打开落射照明装置的视场光阑和孔径光阑。

⑤打开落射照明装置的电源开关,打开DIH头电源开关(启动电动光闸),打开光闸后光源照明(每次关闭汞灯后,请等候至少30min。以使汞灯冷却后再开)。

⑥将10×物镜置入光路。

⑦放人标本并将要观察部分移入光路中。

⑧对标本调焦。

⑨转换到需要的物镜并观察标本。

a.用落射荧光装置的ND减光片调节亮度。

b.调节视场光阑使其刚好外切视场。

c.使用油浸物镜时.在标本和物镜间滴人镜油:油浸物镜使用完成后请及时擦拭干净。

⑩完成观察后关掉所有电源开关。

(3)拍照

①在显微镜目镜中对好视野及焦距。

②将显微镜光路转换到数码相机所在的“port”。

③打开Nis—elenlents软件。

④选择[Acquire]菜单中的[Live fast],选择适当的曝光时间使预览图片的亮度合适。

⑤在拍摄明场图像前请先点[auto white],做白平衡。如果是拍摄荧光图片请千万不要做此步骤。

⑥如果需要标尺,则在软件上选择相应倍数的快捷键。

⑦点拍摄按钮拍摄,等待几秒后图片传回电脑并在软件窗口里显示,通过File→Save as将照片另存为tlf格式。

⑧继续拍摄下一张照片。

(4)柯勒照明的调节

①将屈光度调节至0度。

②将聚光镜升到最高位置。

③将孔径光阑打到最大。

④选择10×物镜.在镜下调焦,直到焦面清楚。

⑤将视场光阑缩小到最小,调节聚光镜高度,直到视野里出现了清晰的六角形轮廓。

⑥调节聚光镜的位置调节旋钮把六角形轮廓调整到视野的中心。

⑦逐步扩大视场光阑,直到和视野相外切。

⑧柯勒照明调节结束,视场光阑在整个观察过程中不再调节。

2.注意事项

(1)荧光使用开机后至少使用30min才可以关闭,关闭后至少等待30min后才可以使用。

(2)转动物镜转换器时转动物镜上方的橡胶制动圈,禁止直接扭转物镜进行观察倍率的转换。进行高倍观察时.缓慢升降载物台,以免损伤切片。

(3)要用特制的擦镜纸擦镜头,不得直接用手擦拭。显微镜经精心调试,故不得振动和随便拆卸镜头及其他部件,出现故障和损伤应立即报告,用完后包好放回原处。

(4)目镜、物镜、聚光镜等光学部件的表面有灰尘时,应先用吹气球吹+再用棉签蘸清洁液擦拭,方法是由内向外螺旋形擦拭。

(5)清洁液建议使用70%乙醚和30%无水酒精混合液。

(6)在使用完毕下班关机时.将镜体电压调至最低,防止重新开机时电压过高损坏灯泡。

3.维护与保养

(1)镜头清洁

①用软刷或镜头纸扫去或轻轻擦拭。

②用软棉布、镜头纸蘸湿纯乙醇甲醇擦拭透镜的油污及指印。

③先用精制轻油后用甲醇除去物镜的浸油,或单用甲醇擦拭3~4次。

④不要用精制轻油清洁目镜底部透镜人口,及物镜的棱镜表面。

⑤用乙醇时需按厂家要求进行。

(2)机体清洁

①用硅胶布清洁。

②用软棉布、镜头纸蘸中性去污剂轻擦以除顽固污渍。

(3)用70%医用酒精对机体常规消毒:

(4)存放

①存放于干燥、霉菌不可能形成的地方。

②物镜目镜宜存放在干燥盒内。

③使用后关闭电源.待灯室冷至室温时盖上防尘罩。

来源:北京标准物质网www.biaowu.com

 


【关键词】显微镜 标本 北京标准物质网 

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