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叶绿素的提取和分离方法

BNCC陈丹-会员头像-www.biaowu.com北纳生物
BNCC陈丹 2021-09-08 08:22 评论( 0 ) 浏览( 834 )
叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。提取步骤如下: (1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。 (2) 将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。 (3) 将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100mL丙酮的漏斗中,然后轻轻地旋转,同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃,只剩石油醚溶液。 (4) 将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后,用含有石油醚和0.01克草酸的200mL 80%的甲醇溶液清洗5次以上,最后得到黄绿色悬浮液。 (5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥,并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中,然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素,使之只含有天然的叶绿素。 (6) 含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层,绿层有4-10mm的叶绿素b层,另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。 (7) 将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半)放入醚中,对此悬浮液进行过滤、洗提,用蒸馏水清洗,用硫酸钠干燥,再用器皿进行过滤后,得到叶绿素a。 (8) 将(6)中的绿层中间部分移出,迅速放入醚中过滤、洗提,制成叶绿素b醚溶液。
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