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该方法采用高效液相色谱法测定维生素B6（C8H10NO5P）的含量，该方法适用于维生素B6。
一、方法原理：供试品制成流动相溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长291nm处检测维生素B6吸收值，计算出其含量。
二、试剂：1. 甲醇，2. 0.04%戊烷磺酸钠溶液（用冰醋酸调节pH值至3.0），3. 冰醋酸。
三、仪器设备：1. 仪器1.1 高效液相色谱仪1.2 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按维生素B6峰计算不低于4000。1.3 紫外吸收检测器。
2. 色谱条件2.1 流动相：0.04%戊烷磺酸钠溶液 甲醇=85 15。2.2 检测波长：291nm；2.3 柱温：室温。
四、试样制备：1. 称取供试品：精密称取该品适量。2. 对照品溶液的制备：精密称取维生素B6对照品适量，同供试品配制，摇匀，即得。3. 供试品溶液的制备：将供试品加流动相溶解并定量稀释制成每1mL含有约0.1mg的溶液，摇匀，即得。
五、操作步骤：分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长291nm处测定维生素B6的吸收值，计算出其含量。
相关链接：维生素B6，维生素B6溶液标准物质，维生素B6杂质A
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