1、HPLC
HPLC因其分析速度快、灵敏度高、精确度高并能同时分析多个化合物被广泛应用于分析检测各类化合物,也是测定生物胺的最常用方式。由于大部分生物胺没有荧光和紫外发色基团,因此需经衍生化后才能测量。常用的衍生化试剂为邻苯二醛(o-phthalaldehyde,OPA)、丹磺酰氯(dansyl chloride,Dns-Cl)、二硝基苯甲酰氯(dinitro benzoyl chloride,DABS-Cl)、苯甲酰氯(benzoyl chloride)等。Dns-Cl是生物胺HPLC检测中应用最多的衍生试剂,其衍生操作简单、衍生物稳定性好且检测范围更广。利用Dns-Cl衍生化并快速方便地分析奶酪中的生物胺,可大大缩短分析时间及成本。已经利用串联质谱技术测定肉中的生物胺水平,此方法最大的特色是不需要衍生化,HPLC分离后直接利用串联质谱检测,灵敏度高而且操作十分简单,已经可以同时测定10 种未衍生化的生物胺。
2、毛细管电泳
毛细管电泳也可以直接对生物胺进行分析而并不需要衍生化处理。以UV为检测器,利用毛细管区带电泳技术无需衍生化就能区分6 种生物胺,结合电导检测可同时检测8 种生物胺。当以荧光异硫氰酸酯为衍生剂时,8 种生物胺的检测限可达10-8 mol/L。
3、生物传感器法
生物传感器法是利用酶、抗原、抗体等物质作为传感器的探针,与样品中的生物胺发生特异性反应,通过转换器后检测信号的变化,从而对生物胺进行定性和定量分析。较常用的方法是把胺氧化酶固定在探针上,当胺氧化酶催化脱去生物胺的氨基后形成过氧化氢,通过测定过氧化氢的量确定生物胺的含量。