堪萨斯分枝杆菌的传代方法

BNCC陈丹 2023-02-17 15:17 评论( 0 ) 浏览( 465 )

1、培养基：7H10琼脂培养基（英文名：7H10）：硫酸铵0.5g，磷酸二氢钾1.5g，磷酸氢二钠1.5g，柠檬酸钠0.4g，硫酸镁0.025g，氯化钙0.5mg，硫酸锌0.001g，硫酸铜0.001g，L-谷氨酸钠0.5g，柠檬酸铁铵0.04g，盐酸吡哆醇0.001g，生物素0.5mg，孔雀石绿0.25mg，琼脂15.0g，并吸取5ml甘油，加入900ml蒸馏水中，加热搅拌溶解，煮沸1分钟，PH值6.4-6.8。121℃高压灭菌10分钟。冷却50-55℃时，加入过滤除菌的OADC添加剂100ml，混匀，倾注平皿或试管。

2、传代方法：①准备2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

3、生长条件：37℃；5-7天；好氧。

4、存储条件：2-8℃。

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