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通过氧化菌体的活性基团，呈现杀菌作用，高锰酸钾能有效杀灭各种细菌繁殖体、真菌、结核杆菌；亦能灭活乙型肝炎病毒和芽孢，但对芽孢作用需要较长时间。有机物加热，在酸或碱性条件中均能加速氧化反应。在不同pH值条件下氧化反应有所区别，在酸性溶液中本身被还原为无色的二价锰化合物；在中性或碱性溶液中被还原成褐色的二氧化锰和蛋白复合物沉淀。低浓度具有抗菌、收敛、止血、除臭等功效。高浓度则有刺激性与腐蚀性。其抗菌作用比过氧化氢强。临床上主要用作急性皮炎或急性湿疹（特别是伴继发感染时），清洁溃疡或脓疡，口服吗啡、阿片、马钱子碱或有机毒物等中毒时洗胃及蛇咬伤急救治疗。也用于水果、食具等的消毒。口腔用于白色念珠菌感染、坏死性龈口炎、牙周病的含漱或冲洗等。高锰酸钾接触衣物会留下棕色痕迹，可以加草酸在水中揉搓便可除去。
误服高锰酸钾溶液可出现一系列胃肠道刺激症状，如口咽部烧灼感、肿胀、恶心、呕吐、胃部疼痛等，严重时发生言语、吞咽和呼吸困难，亦可发生蛋白尿，致死量为10g。溶液宜新鲜配制，时间稍久即还原失效。不宜与还原剂如甘油、碘、糖等研合，以防爆炸。高浓度对皮肤有刺激性。
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