核糖核酸（缩写为RNA，即Ribonucleic Acid），存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种，即A（腺嘌呤）、G（鸟嘌呤）、C（胞嘧啶）、U（尿嘧啶），其中，U（尿嘧啶）取代了DNA中的T（胸腺嘧啶）。核糖核酸在体内的作用主要是引导蛋白质的合成。今天小编整理了醋酸钠乙醇沉淀法核酸纯化实验方法，具体操作流程如下文。

1 实验方法原理

核酸是多聚阴离子的水溶性化合物，可以与许多1价、2价离子结合形成盐类，后者在有机溶剂中不溶解也不变性。在较低温度下形成沉淀。

2 实验材料

2.1 试剂、试剂

 醋酸钠缓冲液、无水乙醇70%乙醇、待纯化样本。

2.2 实验试剂

3mol／L醋酸钠缓冲液，pH5.2：称取醋酸钠（NaAC·3H20）408.1g，由于800ml水中，用冰醋酸调节至pH5.2，加重蒸馏水至1000ml．分装后高压灭菌（以下称3mol/L醋酸钠缓冲液）。

无水乙醇及70％（V／V）乙醇。

3 实验操作

（1） 将含核酸的溶液用移液器转至一新的Eppendorf离心管，同时测量合算溶液的体积。

（2）加入1／10体积的3 mol／L醋酸钠缓冲液。使醋酸钠的终浓度为0.3mo1/L。

（3）下颠倒混匀后，准确加入2倍体积（RNA为2.5倍体积）的预冷无水乙醇，颠倒混匀，置冰浴中15－30 min或一20℃30 min。

（4）4℃12000 r／min，离心15 min。

（5）手持Eppendorf成45度角，使核酸沉淀面向上，用微量移液器或连接真空泵的吸头不可接触沉淀物。

（6） 向管中加入预冷的70%乙醇至2／3体积．混匀漂洗，以除去残余的盐。

（7）4℃12000 r／min离心 2min，如步骤5吸取上清液。

（8） 不盖管盖置室温10－l5min或真空中2 min，使乙醇挥发。

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