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称取混合饲料样品2 g，置于具塞锥形瓶中，加入50 mL的乙腈于振荡器振荡提取30 min，过滤，滤液备用。准确吸取试液混合饲料2 mL，移入用10 mL乙腈淋洗过的碱性氧化铝小柱中，令其自然流速流出。待试液全部流出后吹干，用2次2 mL流动相洗脱，收集洗脱液，并过0.45μm的滤膜，滤液上HPLC测定。在1 000 mL容量瓶中加入750 mL去离子水，移取冰乙酸3 mL加入水中，与250 mL乙腈混合，摇匀，过0.45μm滤膜，脱气，备用。将5种磺胺类药物混标进HPLC分析，磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉浓度均是4mg/mL。
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