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抗体的蛋白质检测存在一些缺点,抗体的可用性和质量差别很大。通过分析人类蛋白靶标有关的抗体的系统生发和特征,来寻找解决这些问题的方法。一种称为三重四极杆质谱仪(triple quadrupole)技术的质谱方法能检测到独一无二的特异性肽段,帮助研究人员高灵敏度,可重复性的定量监测这些蛋白。定向蛋白质组的核心是利用串联四级杆质谱特有的MRM扫描方式来定向检测蛋白质,通过软件计算要检测蛋白质的肽对应的母子离子对,用串联四级杆质谱进行MRM扫描,得到MRM色谱峰,一般还会进行MSMS扫描,以对这些肽的MRM进行序列确认,或利用 MSMS进行定性和翻译后修饰位点检测等。PRM靶向蛋白质组,是一种基于高分辨、高精度质谱的靶向定量技术,其基本原理是:四级杆(Q)首先选出的目标肽段离子,进入碰撞室中打碎后,所有的碎片离子经过质量分析器产生一张高分辨的二级质谱图,通过提取其中的碎片离子信息即可实现目标肽段的定量。能够对目标蛋白质/肽段(以及含有修饰的肽段)进行选择性检测,靶向蛋白质组扫描就像精准狙击,排除干扰,目标明确,每一枪直指目标。从而实现对目标蛋白质/肽段的精准定量。靶向蛋白质组扫描就像精准狙击,排除干扰,目标明确,每一枪直指目标。
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