革兰氏染色是鉴别细菌种类的重要特性之一，这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同，可将细菌分成两类，即革兰氏阳性与革兰氏阴性。那么革兰氏染色具体实验过程是怎样的呢？

下面我们以BNCC132503蜡样芽孢杆菌为例，为大家演示革兰氏染色过程！

一、涂片：

取洁净载玻片，滴加一小滴生理盐水，用一次性接种环挑取待检菌培养物少许，研入生理盐水中，与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的菌膜。

二、干燥：

涂片自然干燥，也可在远离火焰上方的热空气中烘干，切勿靠近火焰。

三、固定：

将涂片涂有菌膜的一面向上，迅速在火焰上来回通过3次，玻片反面触及皮肤、热而不烫为宜。

四、初染：

1.滴加草酸铵结晶紫染液于菌膜表面，使染液覆盖菌膜，染色1分钟；

2.拿住玻片使之成45°角，用蒸馏水把多余的染料冲洗掉，用吸水纸吸去多余的水，等待干燥。

五、媒染：

1.滴加革兰氏碘液覆盖菌膜，维持1分钟；

2.用蒸馏水缓慢冲洗涂片上的染色液，等待干燥。

六、脱色：

滴加脱色酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，15-30s后进行水洗，用吸水纸在载玻片边缘吸干积水，等待干燥。

七、复染：

滴加沙黄复染液于菌膜表面，染色1分钟，蒸馏水冲洗，用吸水纸在载玻片边缘吸干积水，等待干燥

八、镜检：

滴加香柏油用显微镜进行观察，蜡状芽孢杆菌在显微镜下形态为杆状，菌体被染成蓝色，因此该菌为革兰氏阳性菌。

如何使用显微镜？请关注我们下期视频《显微镜的使用方法》

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