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RNAi技术的前世今生

天边-会员头像-www.biaowu.com北纳生物
天边 2021-12-09 12:58 评论( 0 ) 浏览( 810 )
生物体有很多机会被来自病毒、细菌等外源性基因随机整合到宿主细胞基 因组内。但宿主会说,“你有张良计我有过墙梯”,这个过墙梯就是RNAi:宿主细胞会对这些 外源性基因dsRNA随即产生反应,被核酸内切酶Dicer切割成小片段RNA (即siRNA)。siRNA 再与体内一些酶结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。 RISC与外源性基因表达的mRNA进行特异性结合并将其切割,使得mRNA降解。然后siRNA 还会“乘胜追击”,可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶作用下合成更多新的dsRNA, 新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA,从而使RNAi的作用进一步放大,最 终将靶mRNA完全降解。 在RNAi感染过程中,产生dsRNA的一个有效方法就是在体内表达一个短发夹RNA分子,这种 shRNA包含两个短反向重复序列(其中一个与目的基因互补),中间由一个loop序列分隔,组成 发夹结构。在体内shRNA可以被加工siRNA。
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