先了解质粒的基本组成元素。 1）复制起始点Ori。该位点决定了质粒的宿主及质粒的拷贝数，它是质粒中一段特定序列，富含AT和重复序列。 图谱上只有一个Ori，表示质粒是原核克隆表达质粒；有两个Ori，则表示该质粒是，穿梭质粒，即可在原核也可在真核中复制。 2）抗性筛选基因。图谱中Kan/tet就是抗生素抗性基因，方便后续通过抗生素筛选阳性克隆。特点就是单词最后会以大写R或上标r结束。 一般克隆载体只有一种抗性筛选标记，部分表达载体及穿梭质粒具有两种抗性筛选标记。 3）多克隆位点（MCS），即一系列限制性内切酶酶切位点，是外源DNA插入位点，一般可通过酶切/连接方式将外源DNA插入质粒，外源DNA 一般小于10kb，而片段越长，转化效率越低。 一般位于转录启动和转录终止信号之间；所包含的限制性内切酶位点数量和组成因载体不同会有所差异，且其中的酶切位点在质粒中为单一的酶切位点；同时在使用时需注意质粒载体与外源DNA酶切位点的兼容性问题。 荧光标记或蛋白标签序列。蛋白纯化标签蛋白：His-Tag, GST-Tag等；蛋白检测标签蛋 白：Myc-Tag， Flag-Tag， HA-Tag 等；荧光蛋白表达标签：GFP, mCherry 等。